首页 > 知识库 > 正文

X-α-Gal是什么 关于X-α-Gal的详细介绍

X-α-Gal是一种酵母半乳糖苷酶(MEL1) 的显色底物,用于在培养基直接检测GAL4系统的酵母双杂交作用。通过蓝白颜色筛选,快速和简便地识别阳性的蓝色克隆,无需费时的α-半乳糖苷酶报告基因检测。 基本信息 中文名:X-α-Gal 外文名:5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-α-D-galactopyranoside;X 别名:5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-半乳糖苷 适应症:请看正文 用法用量:请看正文 不良反应:请看正文

量容

分子式

C14H15BrCNO6

分子量

408.64 g/mol

报告基因 Mel表达后,在含X-α-Gal的平板上显蓝色

溶解性

清澈溶液(2%in DMF)

储存

4℃ 避光避潮;长期存放-20℃

用途

X-α-半乳糖苷酶的作用底物,用于筛选含X-α-半乳糖苷酶基因的阳性酵母或细菌菌株。在组织化学中用于酶活性的检测。

贮液

A)涂布于预制平板: 溶解24mg X-α-gal 于6 mL DMF中得到终浓度为4 mg/mL的溶液。

B)直接加入琼脂中: 溶解60mg X-α-gal 于3 mL DMF中得到终浓度为20 mg/mL的溶液。

参考用法

涂布于预制平板

1.涂布200ul(15cm) 或者100ul(10cm) X-α-gal 贮液于预制平板上。

2. 放于37 oC培养箱至液体被吸收(约4小时)。

3. 将转化细菌或酵母涂于平板上并于合适温度培养至蓝色菌落出现。

直接加入琼脂中

1. 将已灭菌琼脂培养基冷却至55-50 oC。

2. 在已冷却的培养基中加入20 mg/ ml X-α-Gal贮液,混匀,快速倒平板。

References

1. Aho S., Arffman A., Pummi T., Uitto J., A novel reporter gene MEL1 for the yeast two-hybrid system. Anal Biochem. 1997. 253, 270-2.

2. Chevalier P., et al., X-α-Gal-base medium for simultaneous enumeration of bifidobacteria and lactic acid bacteria in milk. J. Microbiol. Methods. 1991. 13, 75.

3. Gossrau R., Lojda Z., Histochemical detection of α-D-galactosidase with 5-Br-4-Cl-3-indoxyl α-D-galactoside. Acta Histochem. 1989. 85, 213-22.

4. Perry J.D., Ford M., Taylor J., Jones A.L., Freeman R., Gould F.K., ABC medium, a new chromogenic agar for selective isolation of Salmonella spp. J. Clin. Microbiol. 1999. 37, 766-8.

声明:本网内容收集自互联网,旨在传播知识仅供参考,不代表本网赞同其观点,文字及图片版权归原网站所有。

猜你喜欢
热门推荐
今日推荐 更多
猜你喜欢